CEPAS DE ESCHERICHIA COLI MODIFICADAS POR INGENIERIA METABOLICA PARA LA PRODUCCION DE (R)-3-HIDROXIBUTIRATO.

Autores UNAM:
ALFREDO MARTINEZ JIMENEZ; LUZ MARIA MARTINEZ MEJIA; GEORGINA TERESA HERNANDEZ CHAVEZ; GUILLERMO GOSSET LAGARDA;
Número de solicitud:
MX/a/2016/007425
Fecha de presentacion:
08/06/2016
Numero de concesion:
380633
Fecha de concesión:
11/03/2021
Resumen:

La presente invención se refiere a nuevas cepas de Escherichia coli y derivadas que producen (R)-3-hidroxibutirato (R3HB) con un alto rendimiento y alta selectividad, dichas cepas se modificaron genéticamente por ingeniería de vías metabólicas para expresar dos genes de Azotobacter vinelandii (genes phbA y phbB) junto con la sobreexpresión de la tioesterasa II de E. coli (gen tesB). Además comprende nuevas cepas a las que se les eliminó las vías que compiten por el flujo de carbono para la acumulación de acetil-CoA y se les incrementó la disponibilidad de NADPH por medio de una gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa dependiente de NADP+ de Streptococcus mutans. También comprende la solución técnica, no obvia a la generación inespecífica de ácido acético por la tioesterasa II nativa de E. coli; a decir de requerir la vía de generación-regeneración de acetato por las enzimas fosfotransacetilasa y acetato quinasa, para regenerar acetil-CoA a partir del ácido acético generado por TesB, con el fin de obtener una mayor producción de R3HB en fondos genéticos de E. coli que permiten el consumo de acético. Particularmente comprende procesos de fermentación con medios de cultivo con glucosa y/o xilosa, inclusive hidrolizados de lignocelulosa, como fuente de carbono y en condiciones de limitación de oxígeno moderada, utilizando una cepa de E. coli transformada con el plásmido de producción que expresa los genes phbB, phbA y tesB en operón. La invención también comprende nuevos métodos de producción de R3HB sobreexpresando el gen gapNopt en cepas de E. coli con un sistema de plásmidos.


Entidades por adscripción en la UNAM:
Instituto de Biotecnología;